Οι διαφάνειες μικροσκοπίου χρησιμοποιούνται για την εξέταση μονοκύτταρων οργανισμών και την εξέταση από κοντά σε μικρά φυτά και οργανισμούς. Υπάρχουν δύο τύποι προετοιμασμένων διαφανειών: στεγνές βάσεις και υγρές βάσεις. Κάθε τύπος μεθόδου παρασκευής χρησιμοποιείται για την τοποθέτηση διαφορετικών τύπων κυψελών. Εάν είστε βρεγμένοι και τοποθετείτε ένα ιδιαίτερα χλωμό ή ημιδιαφανές δείγμα, ίσως χρειαστεί να βάψετε το δείγμα, ώστε να είναι ορατό κάτω από το μικροσκόπιο.
Βήματα
Μέθοδος 1 από 3: Προετοιμασία στεγνώματος
Βήμα 1. Επιλέξτε μια καθαρή διαφάνεια
Κρατήστε μια τσουλήθρα μέχρι μια πηγή φωτός και κοιτάξτε μέσα για να βεβαιωθείτε ότι δεν έχει μουτζούρες και βρωμιά. Οι περισσότερες διαφάνειες μικροσκοπίου είναι επίπεδες πάνω και κάτω και έχουν ορθογώνιο σχήμα. Είναι διαυγή, επιτρέποντας στο φως από το μικροσκόπιο να περάσει και να φωτίσει το ημιδιαφανές δείγμα δείγματος. Εάν η διαφάνειά σας είναι βρώμικη ή λερωμένη, δεν θα μπορείτε να εξετάσετε αποτελεσματικά το δείγμα σας.
Εάν διαπιστώσετε ότι η πλάκα του μικροσκοπίου σας έχει οποιαδήποτε μόλυνση-συμπεριλαμβανομένων των δικών σας δακτυλικών αποτυπωμάτων-κάντε μια γρήγορη πλύση με υγρό σαπούνι και νερό. Στεγνώστε τη διαφάνεια χρησιμοποιώντας ένα καθαρό πανί. Μη χρησιμοποιείτε χαρτομάντηλα ή χαρτοπετσέτες, καθώς μπορεί να αφήσουν χνούδι πίσω
Βήμα 2. Ελέγξτε το δείγμα για να διαπιστώσετε εάν πρέπει να τεμαχιστεί
Το δείγμα δείγματος πρέπει να είναι ημιδιαφανές (ή ημιδιαφανές) έως διαφανές για να περάσει το φως. Εάν το φως δεν μπορεί να περάσει πλήρως από το δείγμα και στο προσοφθάλμιο του μικροσκοπίου, δεν θα μπορείτε να δείτε το δείγμα μέσω του μικροσκοπίου.
Μερικά από τα δείγματα (π.χ. ένα σκέλος τρίχας ή μια πτέρυγα εντόμων) είναι λεπτά και ημιδιαφανή από μόνα τους και δεν θα χρειαστεί να τεμαχιστούν με ξυράφι
Βήμα 3. Κόψτε ένα λεπτό κομμάτι του δείγματος δείγματος
Χρησιμοποιήστε μια λεπίδα ξυραφιού για να κόψετε το δείγμα σας σε μια λεπτή, ημιδιαφανή φέτα. Οι στεγνές βάσεις είναι οι πιο απλές στην προετοιμασία, καθώς δεν χρησιμοποιούν καθόλου υγρό μεταξύ της πλάκας και του δείγματος. Η στεγνή βάση είναι ιδανική για την επιθεώρηση δειγμάτων που δεν κινδυνεύουν να στεγνώσουν. Τα υλικά που είναι συνήθως στεγνά τοποθετημένα περιλαμβάνουν:
- Ξύλο από φελλό ή μπάλσα.
- Πέταλα ή φύλλα λουλουδιών.
- Πόδια ή φτερά εντόμων.
- Μαλλιά, γούνα ή φτερά.
Βήμα 4. Τοποθετήστε το δείγμα δείγματος στη διαφάνεια
Χρησιμοποιήστε ένα ζευγάρι λαβίδες για να παραλάβετε τη λεπτή φέτα του δείγματος του δείγματος σας. Το βάζετε απαλά στη μία πλευρά της διαφάνειας. Εάν χρησιμοποιείτε μια κοίλη αντικειμενοφόρο πλάκα (στην οποία η μία πλευρά βυθίζεται προς τα κάτω), τοποθετήστε το δείγμα στο κέντρο της κοίλης περιοχής.
- Τοποθετήστε το δείγμα σε μια κοίλη πλάκα εάν ανησυχείτε ότι το δείγμα θα κυλήσει ή θα γλιστρήσει από την επίπεδη διαφάνεια. Για παράδειγμα, χρησιμοποιήστε μια κοίλη διαφάνεια εάν προετοιμάζετε ένα κουλουριασμένο πέταλο λουλουδιών που κυλάει στη μία ή στην άλλη πλευρά.
- Για όλους τους άλλους τύπους δειγμάτων, μια επίπεδη διαφάνεια θα λειτουργήσει καλά.
Βήμα 5. Τοποθετήστε μια ολίσθηση καλύμματος πάνω από το δείγμα δείγματος
Η ολίσθηση του καλύμματος εμποδίζει το δείγμα του δείγματος να πέσει από τη διαφάνεια. Η ολίσθηση θα προστατεύσει επίσης το δείγμα δείγματος σε περίπτωση που κάποιος από τους χρήστες του μικροσκοπίου χαμηλώσει κατά λάθος τον φακό τόσο πολύ ώστε να χτυπήσει το δείγμα.
- Τα καλύμματα είναι πολύ λεπτά, διαφανή κομμάτια γυαλιού ή, συνηθέστερα, πλαστικά. Κάθε δελτίο είναι περίπου 3⁄4 ίντσα (1,9 cm) τόσο στο πλάτος όσο και στο μήκος.
- Η προετοιμασμένη διαφάνειά σας είναι τώρα έτοιμη για επιθεώρηση κάτω από ένα μικροσκόπιο.
Μέθοδος 2 από 3: Προετοιμασία βρεγμένης βάσης
Βήμα 1. Τοποθετήστε 1 σταγόνα νερό στη διαφάνειά σας
Χρησιμοποιήστε ένα σταγονόμετρο για να ρίξετε 1 σταγόνα νερό στο ακριβές κέντρο είτε μιας επίπεδης είτε μιας κοίλης διαφάνειας. Αυτό το σταγονίδιο νερού είναι αυτό που δίνει το όνομα στο βρεγμένο βουνό. Το υγρό διατηρεί το δείγμα δείγμα υγρό και εμποδίζει τα υγρά, οργανικά δείγματα δείγματος να στεγνώσουν και να αλλοιώσουν το σχήμα τους. Το νερό διατηρεί επίσης ζωντανά δείγματα, όπως οι μονοκύτταροι οργανισμοί.
Εάν θέλετε να κάνετε μια μόνιμη διαφάνεια χρησιμοποιώντας νεκρό οργανικό υλικό, μπορείτε να χρησιμοποιήσετε ένα λεπτό στρώμα διαυγούς βερνικιού νυχιών αντί για ένα σταγονίδιο νερού
Βήμα 2. Ξύστε ή κόψτε ένα τμήμα υγρού δείγματος δείγματος
Δείγματα δειγμάτων που χρησιμοποιούνται για υγρές βάσεις είναι συνήθως υγρό ή ζωντανό οργανικό υλικό. Χρησιμοποιήστε ξυράφι ή οδοντογλυφίδα για να κόψετε ή να ξύσετε μια μικρή ποσότητα υγρού δείγματος σας. Τα υλικά που χρησιμοποιούνται συνήθως για την κατασκευή αντικειμενοφόρων πλακών περιλαμβάνουν:
- Κύτταρα μάγουλων ή πλάκα δοντιών (ξυσμένα από το στόμα με οδοντογλυφίδα).
- Μια λεπτή διατομή ενός στελέχους φυτού (κομμένο με ξυράφι).
- Εάν μελετάτε μονοκύτταρους οργανισμούς-για παράδειγμα, μια αμοιβάδα ή ένα τσιμπιδάκι με παραμέσιο δεν θα κάνει καλό. Αντ 'αυτού, χρησιμοποιήστε ένα καθαρό σταγονόμετρο για να μαζέψετε μερικές σταγόνες από το νερό στο οποίο κολυμπούν οι μονοκύτταροι οργανισμοί ή τα φύκια.
Βήμα 3. Τοποθετήστε το δείγμα σας στη σταγόνα νερού
Ανάλογα με τον τύπο υλικού που χρησιμοποιείτε ως δείγμα δείγματος, χρησιμοποιήστε ένα ζευγάρι λαβίδες, τσιμπιδάκια ή μια οδοντογλυφίδα για να μεταφέρετε το δείγμα σας στη διαφάνεια. Τοποθετήστε το δείγμα στο κέντρο της σταγόνας νερού σας, έτσι ώστε να αιωρείται στο υγρό.
Εάν χρησιμοποιείτε σταγονόμετρο για να μαζέψετε μονοκύτταρους οργανισμούς, τοποθετήστε 1 ή 2 σταγόνες στη σταγόνα νερού που βρίσκεται ήδη στη διαφάνεια
Βήμα 4. Τοποθετήστε ένα κάλυμμα κάλυψης πάνω από το υγρό δείγμα
Κρατήστε την ολίσθηση του καλύμματος υπό γωνία 45 °. Τοποθετήστε ένα από τα άκρα προς τα κάτω ακριβώς δίπλα στο δείγμα της σταγόνας νερού. Στη συνέχεια, χαμηλώστε την άλλη πλευρά της αντικειμενοφόρου πλάκας μέχρι να είναι επίπεδη στην κορυφή του δείγματος. Θα πρέπει να δείτε τις σταγόνες νερού να απλώνονται κάτω από την ολίσθηση του καλύμματος μέχρι να φτάσουν στις άκρες του.
Μην αγγίζετε ή πιέζετε το κάλυμμα του καλύμματος μόλις είναι στη θέση του. Εάν το κάνετε, θα διακινδυνεύσετε να σκουπίσετε το δείγμα δείγματος και να απομακρύνετε το νερό από την αντικειμενοφόρο πλάκα
Μέθοδος 3 από 3: Βαφή κυτταρικών δειγμάτων
Βήμα 1. Τοποθετήστε ένα φύλλο χαρτί κουζίνας στο ένα άκρο του καλύμματος
Τοποθετήστε την πετσέτα στην άκρη της ολίσθησης χωρίς να ενοχλείτε το υλικό κάτω από την ολίσθηση του καλύμματος. Η απορροφητική χαρτοπετσέτα θα τραβήξει λίγο από το νερό από κάτω από την ολίσθηση του καλύμματος και θα τραβήξει τον παράγοντα χρώσης κάτω από την ολίσθηση του καλύμματος και επάνω στο δείγμα.
- Εάν το δείγμα διαφανειών που έχετε τοποθετήσει σε υγρό είναι ωχρό ή άχρωμο (π.χ. διατομή ενός άχρωμου στελέχους φυτών), μπορεί να είναι δύσκολο να το δείτε όταν κοιτάτε μέσα από το μικροσκόπιο. Η χρώση του δείγματος θα σας επιτρέψει να δείτε καλύτερα το σχήμα και την υφή του.
- Αυτό γίνεται συνήθως αφού έχετε ήδη εξετάσει το υγρό δείγμα σε μια διαφάνεια χωρίς να το λεκιάσετε. Η διαφάνεια μπορεί να είναι ήδη προετοιμασμένη, ακόμη και αν δεν είναι λεκιασμένη.
Βήμα 2. Τοποθετήστε 1 σταγόνα ιωδίου ή μπλε μεθυλενίου στην άλλη πλευρά του καλύμματος
Χρησιμοποιήστε ένα σταγονόμετρο και ρίξτε το χημικό χρώσης στο πάνω μέρος της πλάκας του μικροσκοπίου, ακριβώς δίπλα στο κάλυμμα του καλύμματος. Προσέξτε να ρίξετε μόνο 1 σταγόνα. Η περίσσεια χρώσης μπορεί να ξεφύγει από την αντικειμενοφόρο πλάκα.
- Το ιώδιο ή το μπλε μεθυλενίου μπορούν να αγοραστούν σε οποιοδήποτε κατάστημα εκπαίδευσης ή κατάστημα προμηθειών βιολογίας.
- Ένας εναλλακτικός τρόπος για να γίνει αυτό είναι να προσθέσετε τη σταγόνα του παράγοντα χρώσης στο νερό σε μια υγρή τοποθετημένη αντικειμενοφόρο πλάκα όταν το προετοιμάζετε για πρώτη φορά. Σε αυτή την περίπτωση, δεν χρειάζεστε χαρτοπετσέτα.
Βήμα 3. Περιμένετε όσο ο παράγοντας χρώσης τραβιέται κάτω από το κάλυμμα της αντικειμενοφόρου πλάκας
Ο χρωστικός παράγοντας θα αρχίσει να διαρρέει κάτω από την ολίσθηση του καλύμματος καθώς η χαρτοπετσέτα βγάζει νερό από την άλλη πλευρά. Μπορεί να χρειαστούν έως και 5 λεπτά για να απορροφηθεί εντελώς το κάλυμμα του ιωδίου ή του μεθυλενίου κάτω από το κάλυμμα της πλάκας και να κορεστεί το δείγμα.
Μόλις το ιώδιο ή το μπλε του μεθυλενίου τραβηχτεί μέχρι το κάτω μέρος του καλύμματος, το δείγμα βάφεται πλήρως
Βήμα 4. Σκουπίστε την περίσσεια χρωστικών με καθαρή χαρτοπετσέτα
Καθαρίστε την επιφάνεια της αντικειμενοφόρου πλάκας ώστε να μην χυθούν υγρά από το πλάι. Η διαφάνειά σας σε υγρή βάση είναι τώρα λεκιασμένη και έτοιμη για παρατήρηση κάτω από ένα μικροσκόπιο.
